污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,因而,培養(yǎng)箱的制造商們設計了多種不同的裝置 去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結合 自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。如帶有紫外消毒功能的培養(yǎng)箱;還有的設計生產了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內空氣,可過濾除去99.97%的 0.3微米以上的顆粒;此外,還開發(fā)設計了能使箱內達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物 ,達到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱。這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是*,但選擇何種清潔裝 置呢?首先,我們考慮的當然是各種方式的滅菌能力,紫外消毒能力是與紫外燈距離目標的 距離的二次方成反比,距離越遠,消毒能力越差,所以紫外消毒方式有其局限性,難以達到 *滅菌的要求;相比較而言,高溫消毒是目前比較有效消毒滅菌的方法,高溫消毒又分為 兩類,一是傳統(tǒng)的高溫干熱消毒,另一種是先進的高溫濕熱滅菌。
接下來我們重點說一下高溫干熱和高溫濕熱兩種方法的優(yōu)劣。高溫濕熱由于蒸汽潛熱大,穿 透力強,容易使蛋白質變性或凝固,因此該法的滅菌效率比干熱滅菌法高。其原因有三:① 蛋白質凝固所需的溫度與其含水量有關,含水量愈大,發(fā)生凝固所需的溫度愈低。濕熱滅菌 的菌體蛋白質吸收水分,所以較同一溫度的干熱空氣中易于凝固。②濕熱滅菌過程中蒸汽放 出大量潛熱,加速提高濕度。因而濕熱滅菌比干熱所需溫度低,如在同一溫度下,則濕熱滅 菌所需時間比干熱短。③濕熱的穿透力比干熱大,使其深部也能達到滅菌溫度,故濕熱比干 熱收效好一些。所以高溫消毒并不是簡單的看消毒溫度,主要是看是否濕熱消毒。